कोशिका संवर्धन माध्यम कितने प्रकार का होता है और इसे कैसे बनाया जाता है?
पशु कोशिका संवर्धन पशु शरीर से प्रासंगिक ऊतकों को लेना है, उन्हें अलग-अलग कोशिकाओं में फैलाना है (ट्रिप्सिन या कोलेजनेज़ का उपयोग करके), और फिर इन कोशिकाओं को बढ़ने और बढ़ने की अनुमति देने के लिए उन्हें एक उपयुक्त संस्कृति माध्यम में डाल दें।
सेल कल्चर मीडिया कितने प्रकार के होते हैं?
सेल कल्चर मीडिया के विकास के इतिहास के अनुसार, सेल कल्चर मीडिया को मोटे तौर पर कई प्रकारों में विभाजित किया जा सकता है, जैसे कि संतुलित नमक घोल, प्राकृतिक सेल कल्चर मीडिया, सिंथेटिक सेल कल्चर मीडिया, सीरम-मुक्त सेल कल्चर मीडिया और सीमित सेल कल्चर मीडिया। रासायनिक घटक।
1. डीएमईएम सेल कल्चर मीडियम
DMEM (Dulbecco का संशोधित न्यूनतम आवश्यक माध्यम) Dulbecco द्वारा MEM माध्यम के आधार पर प्राप्त किया जाता है। प्रत्येक घटक की मात्रा को दोगुना और दो प्रकारों में विभाजित किया जाता है: निम्न चीनी (1000mg / L) और उच्च चीनी (4500mg / L)। कोशिकाएं तेजी से बढ़ती हैं। खराब आसंजन और क्लोन के साथ कल्चर ट्यूमर कोशिकाओं के लिए उच्च ग्लूकोज का उपयोग करना बेहतर है, और इसका उपयोग अक्सर हाइब्रिडोमा की मायलोमा कोशिकाओं और डीएनए के साथ ट्रांसफ़ेक्ट कोशिकाओं को कल्चर करने के लिए किया जाता है।
2. न्यूरोनल बेसिक कल्चर मीडियम
यह न्यूरॉन्स के विकास के लिए बुनियादी पोषक तत्व प्रदान कर सकता है।
3. आईपीएल-41 कीट माध्यम
Ipl-41 कीट माध्यम को स्पोडोप्टेरा फ्रुगिपरडा सेल लाइन के बड़े पैमाने पर विस्तार के लिए डिज़ाइन किया गया है, और आमतौर पर बैकोलोवायरस एक्सप्रेशन सिस्टम (बीईवीएस) द्वारा प्रोटीन अभिव्यक्ति के लिए भी उपयोग किया जाता है। आईपीएल-41 माध्यम मूल आईपीएल फॉर्मूले में सुधार है। इसे वीस एट अल द्वारा विकसित किया गया था। संयुक्त राज्य अमेरिका के कृषि विभाग की कीट विकृति विज्ञान प्रयोगशाला में। इसका उपयोग स्पोडोप्टेरा मीडोवेंसिस व्युत्पन्न सेल लाइनों के बड़े पैमाने पर विस्तार के लिए किया गया था। वीस ने भ्रूण गोजातीय सीरम और टीपीबी माध्यम को मूल माध्यम से जोड़ा, और आईपीएल -21 एई (III) सेल लाइन के बड़े पैमाने पर निरंतर संस्कृति को सफलतापूर्वक महसूस किया।
माध्यम का उपयोग मुख्य रूप से लेपिडोप्टेरा व्युत्पन्न कोशिका रेखाओं के संवर्धन और रखरखाव और इन कोशिका रेखाओं के विषाणुओं को बढ़ाने के लिए किया जाता है। Ipl-41 माध्यम का उपयोग सीरम-मुक्त स्पोडोप्टेरा कोशिकाओं में बैकोलोवायरस पुनः संयोजक प्रोटीन को व्यक्त करने के लिए भी किया गया था।
1.1 संतुलित नमक घोल (बीएसएस)
बीएसएस मुख्य रूप से अकार्बनिक लवण और ग्लूकोज से बना है। इसका कार्य कोशिकाओं के आसमाटिक दबाव संतुलन को बनाए रखना, पीएच स्थिरता बनाए रखना और सरल पोषण प्रदान करना है। यह मुख्य रूप से कोशिकाओं को धोने और अन्य अभिकर्मकों को तैयार करने के लिए उपयोग किया जाता है।
वर्तमान में, सेल कल्चर के लिए उपयोग किया जाने वाला सीरम मुख्य रूप से गोजातीय सीरम है, और कुछ विशेष कोशिकाओं को मानव सीरम और हॉर्स सीरम से भी संवर्धित किया जाता है। गोजातीय सीरम अधिकांश स्तनधारी कोशिकाओं के लिए उपयुक्त है, लेकिन इस बात से इंकार नहीं किया जाता है कि कुछ कोशिकाओं की खेती करते समय यह अन्य पशु सीरम का उपयोग करने के लिए अधिक उपयुक्त है। सीरम में विभिन्न प्लाज्मा प्रोटीन, पॉलीपेप्टाइड, वसा, कार्बोहाइड्रेट, वृद्धि कारक, हार्मोन, अकार्बनिक पदार्थ आदि होते हैं। ये पदार्थ कोशिका वृद्धि को बढ़ावा देने या विकास गतिविधि को बाधित करने में शारीरिक संतुलन प्राप्त करते हैं।
1.2 सिंथेटिक सेल कल्चर माध्यम
सिंथेटिक कल्चर माध्यम एक प्रकार का कल्चर माध्यम है जिसे प्राकृतिक संस्कृति माध्यम की संरचना के अनुसार रासायनिक पदार्थों से संश्लेषित, कृत्रिम रूप से डिजाइन और तैयार किया जाता है। जल्द से जल्द विकसित बुनियादी माध्यम (एमईएम) अनिवार्य रूप से एक पीएच बफर आइसोटोनिक मिश्रण है जिसमें नमक, अमीनो एसिड, विटामिन और अन्य आवश्यक पोषक तत्व होते हैं। इस आधार पर, DMEM, IMDM, ham F12, prmi1640 और अन्य सिंथेटिक सेल कल्चर मीडिया को लगातार विकसित किया गया है।