सेल कल्चर के लिए सावधानियां
सेल कल्चर के लिए सावधानियां
(1) पहली बार एक निश्चित सेल को कल्चर करते समय, आपको संबंधित जानकारी को समझने के लिए पहले सेल का नाम खोजना होगा, जिसमें कल्चर माध्यम, सीरम, एडिटिव्स, सामान्य पाचन समय, बीतने का समय आदि शामिल हैं। विशिष्ट कोशिकाओं के लिए (जैसे प्राथमिक सुसंस्कृत कोशिकाओं के रूप में), अधिक सटीक संस्कृति विधियों को प्राप्त करने के लिए प्रासंगिक साहित्य से परामर्श करना आवश्यक है।
(2) सेल कल्चर में सेल में प्रवेश करते समय, निम्नलिखित चरणों का सख्ती से पालन किया जाना चाहिए:
सुनिश्चित करें कि सेल संचालन के लिए सभी समाधान और उपभोग्य सामग्रियों को बिना किसी समस्या के कीटाणुरहित और परीक्षण किया गया है। अनिश्चित समाधान और उपभोग्य सामग्रियों का उपयोग न करें। विशेष परिस्थितियों में जब तक अन्य लोगों के समाधान उधार न लें।
सुनिश्चित करें कि कपड़ों के कफ लुढ़के हुए हैं या सफेद कोट के कफों को बांधा गया है।
अल्कोहल लैंप में अल्कोहल की मात्रा निर्धारित करें और यदि आवश्यक हो तो इसकी भरपाई करें।
सुनिश्चित करें कि आवश्यक सभी समाधान और उपभोग्य वस्तुएं पहुंच के भीतर हैं। बोतल के ढक्कन को एक हाथ से खोलने के लिए प्रयोग से पहले सभी बोतल के ढक्कनों को ढीला किया जा सकता है।
कोशिश करें कि घोल को सीधे तब तक न डालें जब तक कि बोतल का मुंह जल न जाए। यदि डालना विफल हो जाता है और घोल बोतल के मुंह से चिपक जाता है, तो कृपया बोतल के मुंह की परिधि को 75% अल्कोहल (बोतल के मुंह को न छुएं) के साथ छिड़के हुए कागज़ के तौलिये से सावधानीपूर्वक साफ करें और इसे बोतल के मुंह पर जला दें। ज्योति।
यदि उपयोग की जाने वाली उपभोग्य वस्तुएं ऑपरेशन के दौरान साफ नहीं हैं, तो उन्हें समय पर बदला जाना चाहिए।
प्रयोग के बाद समय पर सफाई करें, कार्य क्षेत्र को साफ सुथरा रखें और अंत में टेबल को 75% अल्कोहल से साफ करें।
(3) कोशिका संदूषण की रोकथाम
प्रयोगशाला की आपूर्ति प्रदूषण को रोकती है। सेल कल्चर के लिए उपयोग किए जाने वाले अभिकर्मकों, उपभोग्य सामग्रियों और उपकरणों को अच्छी तरह से साफ और कीटाणुरहित किया जाना चाहिए, और विभिन्न समाधानों की नसबंदी सावधानी से की जानी चाहिए, और बाँझपन परीक्षण नकारात्मक होने के बाद ही इसका उपयोग किया जा सकता है। प्रचालन कक्ष और शेष रोगाणुरहित उपकरणों को नियमित रूप से साफ, कीटाणुरहित और निष्फल किया जाएगा।
संचालन के दौरान प्रदूषण को रोकें।
कपड़े जो स्थैतिक बिजली उत्पन्न करने में आसान होते हैं या धूल को अवशोषित करते हैं, उन्हें कोशिकाओं में प्रवेश करने से पहले सफेद कोट से बदल दिया जाना चाहिए।
प्रयोग शुरू होने से पहले यह सुनिश्चित कर लेना जरूरी है कि दस्तानों में कोई दिक्कत तो नहीं है। जब तक दस्ताने जैव सुरक्षा कैबिनेट के बाहर की वस्तुओं के संपर्क में हैं, दस्ताने को समय पर कीटाणुरहित किया जाना चाहिए।
सेल कल्चर रूम में प्रवेश करने के बाद, जैव सुरक्षा कैबिनेट के हवा के पर्दे को प्रभावित करने से बचने के लिए दरवाजा बंद करें, बैठें और जितना संभव हो उतना कम चलें। काम से पहले 75% अल्कोहल कॉटन बॉल से हाथ और बोतल के ढक्कन को पोंछ लें। पहले से उपयोग किए गए उपकरण, समाधान और कोशिकाओं की सख्ती से जांच करें। दूषित या गैर-संक्रमित वस्तुओं को बाँझ कमरे में न लाएँ, उन्हें लापरवाही से इस्तेमाल करने की तो बात ही छोड़ दें, ताकि बड़े पैमाने पर प्रदूषण से बचा जा सके।
कोशिकाओं का संचालन हल्का होना चाहिए। बोतल के मुंह को लौ के चारों ओर बाँझ क्षेत्र में खोला जाना चाहिए, और बोतल के मुंह को साधारण घुमाव और जलने के लिए लौ के चारों ओर रखा जाना चाहिए। सावधान रहें कि लौ को प्लास्टिक की बोतल के मुंह में जलने न दें।
प्रायोगिक संचालन के दौरान, बातचीत को कम करने के लिए जैव सुरक्षा कैबिनेट का विभाजन जितना संभव हो उतना कम होना चाहिए। छींकते या खांसते समय अनावश्यक प्रदूषण से बचने के लिए उसे कार्य क्षेत्र की ओर मुंह नहीं करना चाहिए।
बोतल के ढक्कन को गलत संचालन से प्रदूषित होने से बचाने के लिए बोतल के ढक्कन को अपने आप से उल्टा रखना चाहिए।
कपड़ों पर अज्ञात वस्तुओं के गिरने से होने वाले सेल संदूषण से बचने के लिए खुले कंटेनर के ऊपर से न गुजरें।
प्रायोगिक संचालन के दौरान, पाश्चर पिपेट, पिपेट हेड और पिपेट के समय पर प्रतिस्थापन पर ध्यान दें, और एक पाइप को अंत तक न ले जाएं। अशुद्ध या अनिश्चित वस्तुओं के संपर्क में आने की स्थिति में, उन्हें सीधे फेंक दिया जाना चाहिए। प्रयोग के बाद प्रयोगशाला को साफ सुथरा रखने के लिए इसे समय पर साफ करना चाहिए। अंत में, टेबल टॉप को 75% अल्कोहल से साफ किया जाएगा।
(4) कोशिकाओं के क्रॉस संदूषण को रोकें
विभिन्न प्रकार के सेल कल्चर ऑपरेशन करते समय, उपयोग किए जाने वाले उपकरणों को कड़ाई से अलग किया जाना चाहिए, और उन्हें पहचान के लिए चिह्नित करना बेहतर है। ऑपरेशन क्रम में किया जाता है, और एक समय में केवल एक सेल संसाधित होता है। जब कई सेल और कई ऑपरेशन एक साथ किए जाते हैं, तो भ्रम होने की संभावना होती है।
लिक्विड एक्सचेंज या पैसेज ऑपरेशन के दौरान, कोशिकाओं से जुड़े पिपेट हेड और पिपेट को रिएजेंट बोतल के मुंह को नहीं छूना चाहिए, ताकि कोशिकाओं को कल्चर माध्यम में लाने और अन्य कोशिकाओं को प्रदूषित करने से बचा जा सके।
③ एक बार जब सभी सेल खरीद लिए जाते हैं, अन्य स्थानों से पेश किए जाते हैं, या स्वयं स्थापित किए जाते हैं, तो उन्हें समय पर संरक्षित और जमे हुए होना चाहिए। प्रदूषण के मामले में, कोशिकाओं को पुनर्जीवित किया जा सकता है और सुसंस्कृत किया जा सकता है।