सेल कल्चर के लिए आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले उपकरण क्या हैं?
1. अल्ट्रा क्लीन वर्कबेंच
वर्तमान में, सेल प्रयोगशालाओं के विशाल बहुमत सरल ऑपरेशन, सुविधाजनक स्थापना, छोटे स्थान पर कब्जा और अच्छे शुद्धिकरण प्रभाव के साथ, सड़न रोकनेवाला संचालन प्राप्त करने के लिए अल्ट्रा क्लीन वर्कबेंच का उपयोग करते हैं। अन्हुई रेन्हे शुद्धिकरण दो मुख्य प्रकार के सुपर क्लीन वर्कबेंच पेश करता है - साइड फ्लो टाइप (वर्टिकल टाइप) और आउटफ्लो टाइप (हॉरिजॉन्टल लैमिनार फ्लो टाइप)। कार्य सिद्धांत आम तौर पर यह है कि इनडोर हवा को शुरू में मोटे फिल्टर द्वारा फ़िल्टर किया जाता है, केन्द्रापसारक प्रशंसक द्वारा स्थिर दबाव बॉक्स में दबाया जाता है, और फिर उच्च दक्षता वाले एयर फिल्टर द्वारा ठीक फ़िल्टर किया जाता है। परिणामी स्वच्छ वायु प्रवाह एक निश्चित समान अनुभागीय हवा की गति से बाँझ क्षेत्र से होकर गुजरता है, इस प्रकार उच्च स्वच्छता के साथ धूल रहित और बाँझ काम करने का वातावरण बनता है।
(1) साइड फ्लो वर्कटेबल: वायु शोधन के बाद वायु प्रवाह कार्य क्षेत्र के माध्यम से बाएं या दाएं से विपरीत दिशा में, या ऊपर से नीचे या नीचे से ऊपर की ओर बहता है, जिससे कार्य क्षेत्र को बाँझ रखने के लिए एक एयरफ्लो बैरियर बनता है। वर्कटेबल संरचना बंद है;
(2) आउटफ्लो वर्कटेबल: शुद्ध हवा ऑपरेटर की ओर बहती है, इसलिए विदेशी वायु प्रवाह को ऑपरेशन में नहीं मिलाया जाएगा। वर्कटेबल संरचना खुली है, लेकिन हानिकारक पदार्थों का प्रायोगिक संचालन ऑपरेटर के प्रतिकूल है। संबंधित विभागों द्वारा सफाई के लिए अल्ट्रा क्लीन वर्कटेबल की नियमित रूप से जांच की जानी चाहिए। आवश्यकताओं को पूरा करने वाले अल्ट्रा क्लीन वर्कटेबल की सफाई ग्रेड 100 तक पहुंचनी चाहिए, और कण आकार का परीक्षण धूल कण काउंटर के साथ किया जाना चाहिए 5 μ मीटर में धूल कणों की संख्या 3.5 / एल से अधिक नहीं होनी चाहिए; वायु प्रवाह 0.75-1.0m3/s के भीतर नियंत्रित किया जाएगा; जीवाणु कॉलोनियों की औसत संख्या 1 से कम है, और यदि आवश्यक हो तो बाँझपन के अनुसार फ़िल्टर को प्रतिस्थापित करने की आवश्यकता है।
2. माइक्रोस्कोप
इनवर्टेड माइक्रोस्कोप सेल कल्चर प्रयोगशाला के दैनिक कार्य के लिए एक आवश्यक उपकरण है, जिसका उपयोग मुख्य रूप से कोशिका वृद्धि की दैनिक समझ और यह देखने के लिए किया जाता है कि क्या प्रदूषण है। यदि फंड अनुमति देता है, तो किसी भी समय चित्र लेने और सेल की वृद्धि को रिकॉर्ड करने के लिए एक उच्च गुणवत्ता वाले चरण कंट्रास्ट माइक्रोस्कोप, एनाटोमिकल माइक्रोस्कोप, फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप, वीडियो रिकॉर्डिंग सिस्टम या फोटोग्राफिक सिस्टम से लैस टाइम-लैप्स फिल्म शूटिंग डिवाइस का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है।
3. इनक्यूबेटर
विवो में कोशिकाओं की तरह, इन विट्रो में संवर्धित कोशिकाओं को एक स्थिर तापमान पर जीवित रहने की आवश्यकता होती है। आम तौर पर, इष्टतम विकास तापमान 37 ℃ है, और तापमान अंतर ± 0.5 ℃ से अधिक नहीं होना चाहिए। जब तापमान 2 ℃ तक बढ़ जाता है, तो यह कोशिका के अस्तित्व के लिए प्रतिकूल हो जाता है, और तापमान 40 ℃ से ऊपर पहुंचने पर कोशिकाएं जल्द ही मर जाएंगी। इसलिए, थर्मोस्टेटिक इनक्यूबेटर और CO2 इनक्यूबेटर जो तापमान को सटीक रूप से नियंत्रित कर सकते हैं, सबसे अच्छा विकल्प हैं।
(1) लगातार तापमान इनक्यूबेटर: पानी के सबूत या ट्रांजिस्टर प्रकार के स्वचालित तापमान नियंत्रण इनक्यूबेटर का चयन किया जाएगा, जिसमें उच्च संवेदनशीलता और स्थिर तापमान नियंत्रण हो। सामान्य थर्मोस्टेटिक इनक्यूबेटर सस्ता है, लेकिन इसका नुकसान यह है कि यह केवल बंद खेती के लिए उपयुक्त है।
(2) CO2 इनक्यूबेटर: वर्तमान में, अधिकांश सेल कल्चर रूम का व्यापक रूप से उपयोग किया गया है। सीओ 2 इनक्यूबेटर का लाभ यह है कि यह सेल संस्कृति के लिए आवश्यक सीओ 2 (सामान्य एकाग्रता 5% है) की एक निश्चित मात्रा प्रदान कर सकता है, और संस्कृति माध्यम के पीएच को स्थिर करना आसान है, जो खुले या अर्ध खुले के लिए उपयुक्त है संस्कृति। कल्चर बोतल का उपयोग करते समय, कल्चर बोतल के अंदर की दुनिया को हवादार रखने के लिए, बोतल के ढक्कन को थोड़ा ढीला किया जा सकता है। सेल प्रदूषण से बचने के लिए, इस कल्चर विधि का उपयोग करते समय, कल्चर बॉक्स में हवा को साफ रखना चाहिए, और इसे नियमित रूप से पराबैंगनी विकिरण या अल्कोहल से कीटाणुरहित करने की आवश्यकता होती है। उसी समय, संस्कृति समाधान के वाष्पीकरण को रोकने के लिए बाँझ आसुत जल युक्त टैंक को संस्कृति बॉक्स में रखा जाना चाहिए,
(3) सेल कल्चर उपभोग्य वस्तुएं: कल्चर डिश, प्लेट या बोतलों का उपयोग कल्चर सेल में किया जा सकता है।
4. ओवन (सुखाने वाला ओवन)
सेल कल्चर के लिए उपयोग किए जाने वाले कुछ उपकरणों और बर्तनों को उपयोग से पहले सुखाया जाना चाहिए, और कांच के बने पदार्थ को सूखी गर्मी से निष्फल किया जाना चाहिए। शुष्क गर्मी कीटाणुशोधन के दौरान, ओवन में तापमान आमतौर पर 160 ℃ से अधिक तक पहुंच जाएगा, और आमतौर पर एयर ब्लास्ट ओवन का उपयोग किया जाता है। इसके फायदे एकसमान तापमान और अच्छे प्रभाव हैं, जबकि इसके नुकसान धीमी ताप प्रक्रिया हैं। गर्म करते समय, इसे उड़ाने से पहले गर्म करने की अनुमति नहीं है, लेकिन उड़ाने और हीटिंग एक ही समय में शुरू होना चाहिए। जब तापमान 100 ℃ तक पहुँच जाता है, तो फूंक मारना बंद कर देना चाहिए। बर्तनों को लपेटने वाले कागज या रुई को जलाने से बचने के लिए सावधानी बरतनी चाहिए। जला हुआ मलबा कोशिकाओं के विकास को प्रभावित कर सकता है। कीटाणुशोधन के बाद, अचानक ठंडा होने के कारण कांच के बने पदार्थ के टूटने से बचने के लिए बॉक्स का दरवाजा तुरंत नहीं खोला जा सकता है।
5. जल शोधन उपकरण
सेल कल्चर के लिए पानी की गुणवत्ता उच्च है। सेल कल्चर तैयार करने के लिए पानी, सेल कल्चर से संबंधित तरल और सेल कल्चर के बर्तनों की सफाई के लिए पानी को पहले से सख्ती से शुद्ध किया जाना चाहिए। वर्तमान में, शुद्ध पानी के उपकरणों का उपयोग करने के लिए कई प्रकार की शुद्धिकरण विधियां हैं जो साधारण पानी को शुद्ध पानी और अल्ट्राप्योर पानी को बहुत लचीला और सुविधाजनक बना सकती हैं। वे दीवार पर चढ़कर, डेस्कटॉप, पानी के भंडारण टैंक से सुसज्जित, या सीधे तरल पृथक्करण बंदूक के साथ उपयोग किए जा सकते हैं। उन्हें विभिन्न प्रकार के प्रयोगात्मक पानी की आवश्यकताओं के अनुसार नसबंदी कार्यों के साथ भी कॉन्फ़िगर किया जा सकता है, प्रभावी ढंग से डीएनए एंजाइम, आरएनए एंजाइम, प्रोटीज़, आदि को हटाने के साथ-साथ अल्ट्राफिल्ट्रेशन शुद्ध जल उपकरण जो गर्मी स्रोतों और एंडोटॉक्सिन को प्रभावी ढंग से हटा सकते हैं।
6. फ्रिज
सेल कल्चर प्रयोगशाला के आवश्यक उपकरण समर्पित होंगे, और कोशिकाओं के लिए हानिकारक, ज्वलनशील और अन्य पदार्थों को संग्रहीत नहीं करेंगे, और उन्हें साफ रखा जाएगा। आम तौर पर, इसमें साधारण रेफ्रिजरेटर, कम तापमान वाले रेफ्रिजरेटर और अल्ट्रा-लो तापमान रेफ्रिजरेटर शामिल होते हैं।
साधारण रेफ्रिजरेटर: यह कल्चर लिक्विड, नॉर्मल सेलाइन, हैंक्स लिक्विड रिएजेंट और अन्य कल्चर आर्टिकल्स को स्टोर कर सकता है और थोड़े समय के लिए टिश्यू के सैंपल को स्टोर कर सकता है।
-20 ℃ कम तापमान रेफ्रिजरेटर और अल्ट्रा-लो तापमान रेफ्रिजरेटर: जैविक गतिविधि को बनाए रखने के लिए जमे हुए होने की आवश्यकता वाली तैयारी को स्टोर करने के लिए उपयोग किया जाता है और लंबे समय तक संग्रहीत करने की आवश्यकता होती है, जैसे एंजाइम, सीरम इत्यादि।
7. सेल क्रायोस्टेट
आमतौर पर जलाशय में उपयोग किए जाने वाले तरल नाइट्रोजन कंटेनरों को उपयोग की जरूरतों के अनुसार विभिन्न प्रकारों और विशिष्टताओं में विभाजित किया जा सकता है। तरल नाइट्रोजन कंटेनर का चयन करते समय तीन कारकों पर विचार किया जाना चाहिए: मात्रा का आकार, आसान पहुंच और उपयोग, और तरल नाइट्रोजन वाष्पीकरण। तरल नाइट्रोजन कंटेनर का आकार आम तौर पर 25-500L होता है, जो लगभग 250-15000 1ml क्रायोट्यूब को स्टोर कर सकता है। तरल नाइट्रोजन का न्यूनतम तापमान - 196 ℃ तक पहुँच सकता है, इसलिए उपयोग करते समय शीतदंश से बचने के लिए ध्यान दें। चूंकि तरल नाइट्रोजन अस्थिर है, इसलिए शेष तरल नाइट्रोजन की मात्रा का निरीक्षण करना और अपर्याप्त तरल नाइट्रोजन के कारण कोशिका क्षति या मृत्यु से बचने के लिए इसे समय पर पूरक करना आवश्यक है। वर्तमान में, चुनने के लिए कई बुद्धिमान सेल क्रायोप्रेज़र्वेशन कंटेनर हैं। इलेक्ट्रॉनिक नियंत्रकों से लैस तरल नाइट्रोजन कंटेनर स्वचालित क्रायोप्रेज़र्वेशन का एहसास कर सकते हैं; तरल नाइट्रोजन स्तर और नमूना तापमान की निगरानी यह सुनिश्चित करने के लिए की जा सकती है कि नमूना तापमान हमेशा निर्धारित तापमान बिंदु पर हो; तरल नाइट्रोजन स्तर, तापमान, बैटरी, वोल्टेज, बिजली की आपूर्ति और अन्य असामान्यताओं के मामले में अलार्म सिस्टम को अलार्म के लिए कॉन्फ़िगर किया जा सकता है; उसी समय, गर्म हवा को तरल नाइट्रोजन टैंक में प्रवेश करने से - 130 ℃ से अधिक गर्म हवा को रोकने के लिए प्रदान किया जाता है, ताकि नमूने को अधिक प्रभावी ढंग से संरक्षित किया जा सके और कंटेनर में तापमान वृद्धि को रोका जा सके। इसके अलावा, तरल नाइट्रोजन आपूर्ति टैंक को नमूना सुरक्षा सुनिश्चित करने के लिए कनेक्टिंग पाइप के माध्यम से भंडारण टैंक में तरल नाइट्रोजन के पूरक के लिए चुना जा सकता है। तरल नाइट्रोजन स्तर और नमूना तापमान की निगरानी यह सुनिश्चित करने के लिए की जा सकती है कि नमूना तापमान हमेशा निर्धारित तापमान बिंदु पर हो; तरल नाइट्रोजन स्तर, तापमान, बैटरी, वोल्टेज, बिजली की आपूर्ति और अन्य असामान्यताओं के मामले में अलार्म सिस्टम को अलार्म के लिए कॉन्फ़िगर किया जा सकता है; उसी समय, गर्म हवा को तरल नाइट्रोजन टैंक में प्रवेश करने से - 130 ℃ से अधिक गर्म हवा को रोकने के लिए प्रदान किया जाता है, ताकि नमूने को अधिक प्रभावी ढंग से संरक्षित किया जा सके और कंटेनर में तापमान वृद्धि को रोका जा सके। इसके अलावा, तरल नाइट्रोजन आपूर्ति टैंक को नमूना सुरक्षा सुनिश्चित करने के लिए कनेक्टिंग पाइप के माध्यम से भंडारण टैंक में तरल नाइट्रोजन के पूरक के लिए चुना जा सकता है। तरल नाइट्रोजन स्तर और नमूना तापमान की निगरानी यह सुनिश्चित करने के लिए की जा सकती है कि नमूना तापमान हमेशा निर्धारित तापमान बिंदु पर हो; तरल नाइट्रोजन स्तर, तापमान, बैटरी, वोल्टेज, बिजली की आपूर्ति और अन्य असामान्यताओं के मामले में अलार्म सिस्टम को अलार्म के लिए कॉन्फ़िगर किया जा सकता है; उसी समय, गर्म हवा को तरल नाइट्रोजन टैंक में प्रवेश करने से - 130 ℃ से अधिक गर्म हवा को रोकने के लिए प्रदान किया जाता है, ताकि नमूने को अधिक प्रभावी ढंग से संरक्षित किया जा सके और कंटेनर में तापमान वृद्धि को रोका जा सके। इसके अलावा, तरल नाइट्रोजन आपूर्ति टैंक को नमूना सुरक्षा सुनिश्चित करने के लिए कनेक्टिंग पाइप के माध्यम से भंडारण टैंक में तरल नाइट्रोजन के पूरक के लिए चुना जा सकता है। तरल नाइट्रोजन स्तर, तापमान, बैटरी, वोल्टेज, बिजली की आपूर्ति और अन्य असामान्यताओं के मामले में अलार्म सिस्टम को अलार्म के लिए कॉन्फ़िगर किया जा सकता है; उसी समय, गर्म हवा को तरल नाइट्रोजन टैंक में प्रवेश करने से - 130 ℃ से अधिक गर्म हवा को रोकने के लिए प्रदान किया जाता है, ताकि नमूने को अधिक प्रभावी ढंग से संरक्षित किया जा सके और कंटेनर में तापमान वृद्धि को रोका जा सके। इसके अलावा, तरल नाइट्रोजन आपूर्ति टैंक को नमूना सुरक्षा सुनिश्चित करने के लिए कनेक्टिंग पाइप के माध्यम से भंडारण टैंक में तरल नाइट्रोजन के पूरक के लिए चुना जा सकता है। तरल नाइट्रोजन स्तर, तापमान, बैटरी, वोल्टेज, बिजली की आपूर्ति और अन्य असामान्यताओं के मामले में अलार्म सिस्टम को अलार्म के लिए कॉन्फ़िगर किया जा सकता है; उसी समय, गर्म हवा को तरल नाइट्रोजन टैंक में प्रवेश करने से - 130 ℃ से अधिक गर्म हवा को रोकने के लिए प्रदान किया जाता है, ताकि नमूने को अधिक प्रभावी ढंग से संरक्षित किया जा सके और कंटेनर में तापमान वृद्धि को रोका जा सके। इसके अलावा, तरल नाइट्रोजन आपूर्ति टैंक को नमूना सुरक्षा सुनिश्चित करने के लिए कनेक्टिंग पाइप के माध्यम से भंडारण टैंक में तरल नाइट्रोजन के पूरक के लिए चुना जा सकता है।
8. अपकेंद्रित्र
सेल कल्चर में, सेंट्रीफ्यूजेशन का उपयोग आमतौर पर सेल सस्पेंशन तैयार करने, सेल घनत्व को समायोजित करने, कोशिकाओं को धोने और इकट्ठा करने के लिए किया जाता है। 4000 आरपीएम डेस्कटॉप सेंट्रीफ्यूज आमतौर पर कॉन्फ़िगर किया गया है; कोशिका अवसादन करने के लिए, 80-100G केन्द्रापसारक बल की आवश्यकता होती है, क्योंकि अत्यधिक केन्द्रापसारक बल कोशिकाओं को नुकसान पहुंचाएगा। विभिन्न आवश्यकताओं के अनुसार, चुनने के लिए बड़ी क्षमता, समायोज्य तापमान सेंट्रीफ्यूज, हाई-स्पीड सेंट्रीफ्यूज, कम तापमान वाले फ्रीजिंग सेंट्रीफ्यूज और अन्य अधिक कार्यात्मक सेंट्रीफ्यूज हैं।
9. संतुलन
सटीक संतुलन और विश्लेषणात्मक संतुलन आमतौर पर उपयोग किए जाते हैं। विश्लेषणात्मक संतुलन की सटीकता आमतौर पर 0.1 मिलीग्राम, 0.01 मिलीग्राम और 0.001 मिलीग्राम है। आम तौर पर, नमूना मात्रा और सटीकता आवश्यकताओं के अनुसार एक उपयुक्त संतुलन का चयन किया जाता है: नमूना मात्रा 100 मिलीग्राम से अधिक होने पर 0.1 मिलीग्राम की सटीकता के साथ संतुलन का चयन किया जाना चाहिए; नमूना राशि 100-10mg है, और 0.01mg की सटीकता के साथ संतुलन का चयन किया जाता है; 10 मिलीग्राम की नमूना मात्रा के लिए 0.001 मिलीग्राम की सटीकता के साथ संतुलन का चयन किया जाना चाहिए। शेष राशि को नियमित रूप से कैलिब्रेट करने की आवश्यकता है। आसान रखरखाव के लिए स्वचालित अंशांकन फ़ंक्शन के साथ संतुलन का चयन किया जा सकता है। संतुलन का उपयोग करते समय, सफाई पर ध्यान दें, और संक्षारक पाउडर और तरल से सीधे वजन प्लेटफॉर्म से संपर्क करने से बचें।