संस्कृति माध्यम को उपयोग के अनुसार वर्गीकृत किया जाता है

संस्कृति माध्यम को उपयोग के अनुसार वर्गीकृत किया जाता है

13-09-2022

विभिन्न उपयोगों के अनुसार, संस्कृति माध्यम को मूल संस्कृति माध्यम, पोषक संस्कृति माध्यम, संवर्धन संस्कृति माध्यम, चयनात्मक संस्कृति माध्यम, पहचान संस्कृति माध्यम, अवायवीय संस्कृति माध्यम, आदि में विभाजित किया जा सकता है।


1. बुनियादी मीडिया पोषण का आधार है जिसकी आमतौर पर अधिकांश सूक्ष्मजीवों को आवश्यकता होती है। यदि किसी सूक्ष्मजीव की विशेष आवश्यकता है, तो वह इस आधार पर कुछ सामग्री जोड़ सकता है, जैसे कि पेप्टोन वाटर, ब्रोथ कल्चर माध्यम, पोषक तत्व अगर, आदि। 1% पेप्टोन जल माध्यम सबसे सरल बुनियादी माध्यम है। इस बुनियादी माध्यम का उपयोग सामान्य जीवाणु संवर्धन संस्कृति और इंडिगो सब्सट्रेट परीक्षण के लिए किया जा सकता है। यदि संकेतक और शर्करा को जोड़ा जाता है, तो यह चीनी किण्वन परीक्षण के लिए चीनी किण्वन माध्यम में तैयार किया जाएगा और पहचान माध्यम बन जाएगा; यदि 1% पेप्टोन पानी में सोडियम क्लोराइड की खुराक बढ़ा दी जाती है और पीएच को लगभग 8.6 तक बढ़ा दिया जाता है, तो यह विब्रियो कोलेरे की संवर्धन संस्कृति के लिए क्षारीय पेप्टोन पानी बन जाएगा और एक विशेष संवर्धन माध्यम बन जाएगा।


2. पोषक माध्यम बुनियादी संस्कृति माध्यम में कुछ विशेष पोषक तत्व, जैसे ग्लूकोज, रक्त, सीरम, खमीर निकालने, वृद्धि कारक इत्यादि जोड़ता है, ताकि उच्च पोषण संबंधी आवश्यकताओं वाले बैक्टीरिया इसमें विकसित हो सकें। स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया, आदि को रक्त या सीरम युक्त माध्यम में बढ़ने की आवश्यकता होती है; अंडे, आलू, ग्लिसरीन आदि को माइकोबैक्टीरियम ट्यूबरकुलोसिस के संवर्धन माध्यम में अवश्य मिलाना चाहिए। सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला पोषक माध्यम रक्त अगर प्लेट है।


3. संवर्धन माध्यम आमतौर पर एक तरल माध्यम होता है, जिसका उपयोग बैक्टीरिया के संवर्धन के लिए किया जाता है। इसका व्यापक रूप से या विशेष रूप से उपयोग किया जा सकता है। विशेष संवर्धन माध्यम में अक्सर लक्षित जीवाणुओं की वृद्धि के लिए आवश्यक विशेष पोषक तत्व या वृद्धि कारक होते हैं।


4. चयनात्मक मीडिया: चयनात्मक मीडिया में पोषक तत्व (जीवाणुनाशक) और बैक्टीरियोस्टेटिक एजेंट (चयनकर्ता) होते हैं। इस तरह के मीडिया में नमूना टीका लगाए जाने के बाद, बैक्टीरियोस्टेटिक एजेंटों के चयनात्मक निषेध के कारण गैर-लक्षित बैक्टीरिया अलग-अलग डिग्री तक बाधित होते हैं, जो लक्ष्य बैक्टीरिया के प्रसार या पृथक्करण के लिए अधिक अनुकूल है। एक निश्चित अवधि के लिए चयनात्मक माध्यम का उपयोग करके और फिर इसे चयनात्मक पहचान माध्यम में टीका लगाकर लक्ष्य बैक्टीरिया की सकारात्मक पहचान दर में सुधार किया जा सकता है। कई प्रकार के बैक्टीरियोस्टेटिक एजेंट हैं, जैसे मैलाकाइट हरा, शानदार हरा, सोडियम सेलेनाइट, सोडियम डीओक्सीकोलेट, पित्त नमक, सोडियम टेट्रासल्फाइड सल्फोनेट, और विभिन्न एंटीबायोटिक्स। बैक्टीरियोस्टेटिक एजेंटों की अतिरिक्त मात्रा उचित और सटीक होनी चाहिए। कुछ अत्यधिक विषैले होते हैं और कुछ तेज बुखार के प्रतिरोधी नहीं होते हैं। तैयारी पर विशेष ध्यान देना चाहिए।


5. डिफरेंशियल मीडिया एक प्रतिक्रिया सब्सट्रेट और संकेतक है जो कुछ सूक्ष्मजीवों की विशेषताओं को अलग करने और उनकी पहचान करने के लिए संस्कृति माध्यम में जोड़ा जाता है। इसे सामान्य पहचान माध्यम और चयनात्मक पहचान माध्यम में विभाजित किया जा सकता है। वह माध्यम जो केवल विभिन्न माइक्रोबियल प्रजातियों को अलग करने के लिए उपयोग किया जाता है, सामान्य पहचान माध्यम कहलाता है। आम तौर पर, इस तरह के माध्यम में बैक्टीरियोस्टेटिक एजेंट नहीं होते हैं, लेकिन इसमें केवल संकेतक होते हैं, जैसे कि किर्श्नर का बाइसैकेराइड आयरन माध्यम, जिसमें ग्लूकोज और लैक्टोज होता है। फिनोल रेड का उपयोग कल्चर सब्सट्रेट के रंग परिवर्तन और ग्लूकोज और लैक्टोज के लिए बैक्टीरिया की किण्वन क्षमता को निर्धारित करने के लिए इच्छुक सतह का निरीक्षण करने के लिए एक संकेतक के रूप में किया जाता है। फेरिक अमोनियम साइट्रेट डालें, खेती के बाद, निरीक्षण करें कि क्या यह निर्धारित करने के लिए काला जमाव है कि क्या बैक्टीरिया हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन करने के लिए पेप्टोन में सल्फर युक्त अमीनो एसिड को विघटित करता है; एक अन्य उदाहरण ईओसिन मेथिलीन ब्लू एगर है, जिसमें एस्चेरिचिया कोलाई, आंतों के रोगजनक बैक्टीरिया और अन्य विविध बैक्टीरिया की पहचान करने के लिए लैक्टोज (प्रतिक्रिया सब्सट्रेट) और ईओसिन मेथिलीन ब्लू (संकेतक) शामिल हैं। सामान्य पहचान माध्यम की विशेषता सूत्र में संकेतक होते हैं और इसका उपयोग विभिन्न प्रकार के सूक्ष्मजीवों को अलग करने के लिए किया जा सकता है। कुछ पहचान मीडिया का उपयोग बैक्टीरिया की विशेष जरूरतों के रूप में भी किया जा सकता है ताकि कुछ बैक्टीरिया को अलग किया जा सके, जैसे कि ट्रिप्टोन सोयाबीन अगर और चॉकलेट रंग का रक्त अगर। जिसमें एस्चेरिचिया कोलाई, आंतों के रोगजनक बैक्टीरिया और अन्य विविध बैक्टीरिया की पहचान करने के लिए लैक्टोज (प्रतिक्रिया सब्सट्रेट) और ईओसिन मेथिलीन ब्लू (संकेतक) होता है। सामान्य पहचान माध्यम की विशेषता सूत्र में संकेतक होते हैं और इसका उपयोग विभिन्न प्रकार के सूक्ष्मजीवों को अलग करने के लिए किया जा सकता है। कुछ पहचान मीडिया का उपयोग बैक्टीरिया की विशेष जरूरतों के रूप में भी किया जा सकता है ताकि कुछ बैक्टीरिया को अलग किया जा सके, जैसे कि ट्रिप्टोन सोयाबीन अगर और चॉकलेट रंग का रक्त अगर। जिसमें एस्चेरिचिया कोलाई, आंतों के रोगजनक बैक्टीरिया और अन्य विविध बैक्टीरिया की पहचान करने के लिए लैक्टोज (प्रतिक्रिया सब्सट्रेट) और ईओसिन मेथिलीन ब्लू (संकेतक) होता है। सामान्य पहचान माध्यम की विशेषता सूत्र में संकेतक होते हैं और इसका उपयोग विभिन्न प्रकार के सूक्ष्मजीवों को अलग करने के लिए किया जा सकता है। कुछ पहचान मीडिया का उपयोग बैक्टीरिया की विशेष जरूरतों के रूप में भी किया जा सकता है ताकि कुछ बैक्टीरिया को अलग किया जा सके, जैसे कि ट्रिप्टोन सोयाबीन अगर और चॉकलेट रंग का रक्त अगर।


कुछ जीवाणुओं के विकास को रोकने के लिए कुछ अवरोधकों और संकेतकों को संस्कृति माध्यम में जोड़ा जाता है, लक्ष्य जीवाणुओं के प्रसार को बढ़ावा देता है, और बढ़ती जीवाणु कालोनियों में पहचान और चयन की सुविधा के लिए कुछ विशेषताएं होती हैं। इस प्रकार के संस्कृति माध्यम को चयनात्मक पहचान माध्यम कहा जाता है। उदाहरण के लिए, एसएस अगर में मध्यम सूत्र में लैक्टोज (प्रतिक्रिया सब्सट्रेट), तटस्थ लाल, फेरिक अमोनियम साइट्रेट (संकेतक), शानदार हरा और पित्त नमक (बैक्टीरियोस्टेटिक एजेंट) होता है। शानदार हरा और पित्त नमक जैसे बैक्टीरियोस्टेटिक एजेंट ग्राम-पॉजिटिव बैक्टीरिया और कुछ एस्चेरिचिया कोलाई के विकास को रोक सकते हैं, लेकिन साल्मोनेला और शिगेला पर कोई प्रभाव नहीं डालते हैं। इसके अलावा, एस्चेरिचिया कोलाई एसिड का उत्पादन करने के लिए लैक्टोज को किण्वित कर सकता है, जिससे कॉलोनियां लाल हो जाती हैं। साल्मोनेला और शिगेला लैक्टोज को किण्वित नहीं करते हैं, और उनकी कॉलोनियां रंगहीन हैं। यदि बैक्टीरिया हाइड्रोजन सल्फाइड का उत्पादन करते हैं, तो यह फेरिक अमोनियम साइट्रेट के साथ फेरस सल्फाइड वर्षा बनाने के लिए प्रतिक्रिया करेगा, और कॉलोनी केंद्र काला या भूरा है। ताकि पहचान के उद्देश्य को प्राप्त किया जा सके।


हाल के वर्षों में, कुछ बैक्टीरिया के विशिष्ट एंजाइमों का उपयोग करके और संबंधित सब्सट्रेट्स का चयन करके कुछ बैक्टीरिया के लिए विशेष रंग विकसित करने वाला माध्यम देश और विदेश में विकसित किया गया है। इसका उपयोग बैक्टीरिया के अलगाव और पहचान के लिए किया गया है, और इसके अच्छे परिणाम प्राप्त हुए हैं। यह रंग विकसित करने वाला माध्यम वास्तव में पहचान माध्यम भी है। मूल सिद्धांत संस्कृति माध्यम में क्रोमोजेन (या फ्लोरोजेन) और जीवाणु क्रिया सब्सट्रेट के संयोजन को जोड़ना है, और जब बैक्टीरिया में संबंधित एंजाइम होते हैं, तो संयोजन रंग विकसित करने (या फ्लोरोसेंस प्रदर्शित करने) के लिए विघटित हो जाएगा। उदाहरण के लिए, ग्लाइकोसाइड को क्रोमोजेन से अलग करने और रंग प्रदर्शित करने के लिए ग्लाइकोसाइड की क्रिया के तहत क्रोमोजेन ग्लाइकोसाइड संयुग्म को विघटित किया जाता है; फ्लोरोसेंट एमिनो एसिड संयुग्म (कोई फ्लोरोसेंस नहीं) एमिनोपेप्टिडेज की क्रिया के तहत फ्लोरोसेंट पदार्थों से एमिनो एसिड को अलग करके फ्लोरोसेंस प्रदर्शित करता है। रंग विकास के लिए सामान्य क्रोमोजेन हैं: α- नेफ्थोल β- नेफ्थोल, ओ-नाइट्रोफेनॉल, पी-नाइट्रोफेनॉल, पी-नाइट्रोएनिलिन, फिनोलफथेलिन, 2-एमिनो, 4-नाइट्रोबेंजीन, आदि; आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले फ्लोरोफोर्स में 4-मिथाइलंबेलिफेरोन (7-हाइड्रॉक्सी-4-मिथाइलकौमरिन के रूप में भी जाना जाता है) और इसी तरह शामिल हैं। वर्तमान में, रंग विकास माध्यम का उपयोग विभिन्न प्रकार के बैक्टीरिया या कवक के अलगाव, पहचान और संस्कृति के लिए किया जाता है, जैसे साल्मोनेला, एस्चेरिचिया कोलाई, लिस्टेरिया, बिफीडोबैक्टीरियम, लैक्टोबैसिलस, कैंडिडा अल्बिकन्स और अन्य रंग विकास मीडिया। α- नेफ्थोल β- नेफ्थॉल, ओ-नाइट्रोफेनॉल, पी-नाइट्रोफेनॉल, पी-नाइट्रोएनिलिन, फिनोलफथेलिन, 2-एमिनो, 4-नाइट्रोबेंजीन, आदि; आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले फ्लोरोफोर्स में 4-मिथाइलंबेलिफेरोन (7-हाइड्रॉक्सी-4-मिथाइलकौमरिन के रूप में भी जाना जाता है) और इसी तरह शामिल हैं। वर्तमान में, रंग विकास माध्यम का उपयोग विभिन्न प्रकार के बैक्टीरिया या कवक के अलगाव, पहचान और संस्कृति के लिए किया जाता है, जैसे साल्मोनेला, एस्चेरिचिया कोलाई, लिस्टेरिया, बिफीडोबैक्टीरियम, लैक्टोबैसिलस, कैंडिडा अल्बिकन्स और अन्य रंग विकास मीडिया। α- नेफ्थोल β- नेफ्थॉल, ओ-नाइट्रोफेनॉल, पी-नाइट्रोफेनॉल, पी-नाइट्रोएनिलिन, फिनोलफथेलिन, 2-एमिनो, 4-नाइट्रोबेंजीन, आदि; आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले फ्लोरोफोर्स में 4-मिथाइलंबेलिफेरोन (7-हाइड्रॉक्सी-4-मिथाइलकौमरिन के रूप में भी जाना जाता है) और इसी तरह शामिल हैं। वर्तमान में, रंग विकास माध्यम का उपयोग विभिन्न प्रकार के बैक्टीरिया या कवक के अलगाव, पहचान और संस्कृति के लिए किया जाता है, जैसे साल्मोनेला, एस्चेरिचिया कोलाई, लिस्टेरिया, बिफीडोबैक्टीरियम, लैक्टोबैसिलस, कैंडिडा अल्बिकन्स और अन्य रंग विकास मीडिया।


कुछ पहचान माध्यम भी हैं जो विभिन्न विशिष्ट शर्करा, अल्कोहल, अमीनो एसिड या अन्य सबस्ट्रेट्स को एसिड, गैस, क्षार या अन्य दृश्य पदार्थों का उत्पादन करने के लिए बैक्टीरिया के लिए अद्वितीय एंजाइम सिस्टम का उपयोग करते हैं, ताकि बैक्टीरिया की पहचान की जा सके, जैसे कि आमतौर पर जैव रासायनिक मीडिया का इस्तेमाल किया।


जीवाणुओं के जैवरासायनिक अभिलक्षणिक परीक्षण के लिए उपयोग किए जाने वाले संवर्धन माध्यम को शर्करा मुक्त मूल संवर्धन माध्यम में एक विशिष्ट सब्सट्रेट जोड़कर और एक संकेतक जोड़कर विशेषता है। इस तरह के संस्कृति माध्यम में बैक्टीरिया की जैव रासायनिक प्रतिक्रिया परिणामों की एक श्रृंखला अंततः संकेतक के माध्यम से प्रदर्शित की जाती है। इस प्रकार का माध्यम जैव रासायनिक प्रतिक्रिया पहचान माध्यम है। खुराक के अनुसार, इसे प्रमुख जैव रासायनिक माध्यम और लघु जैव रासायनिक माध्यम में विभाजित किया जा सकता है। यह ध्यान देने योग्य है कि जैव रासायनिक परीक्षण माध्यम के कुछ घटक कई कारकों से प्रभावित होते हैं, जैसे उच्च तापमान और पीएच। तैयारी और उपयोग करते समय, प्रभावी घटकों को क्षतिग्रस्त होने से रोकने के लिए वास्तविक स्थिति के अनुसार इसे सख्ती से नियंत्रित किया जाना चाहिए, ताकि इसका उपयोग प्रभाव सुनिश्चित हो सके।


6. एनारोबिक मीडिया एनारोबिक बैक्टीरिया के अलगाव, संस्कृति और पहचान के लिए एक माध्यम है, जिसे एनारोबिक मीडिया कहा जाता है। एरोबिक चयापचय के लिए आवश्यक विभिन्न एंजाइमों की कमी के कारण, जैसे कि साइटोक्रोम और साइटोक्रोम ऑक्सीडेज, कैटेलेज और पेरोक्सीडेज, और सुपरऑक्साइड डिसम्यूटेज, एनारोबेस अपने स्वयं के चयापचय दोषों के कारण एरोबिक चयापचय करने में असमर्थ हैं, और एनारोबिक किण्वन द्वारा उत्पन्न ऊर्जा है अपर्याप्त। इसलिए, अवायवीय सामान्य वायुमंडलीय वातावरण में विकसित और जीवित नहीं रह सकते हैं। अवायवीय जीवाणुओं को सामान्य रूप से विकसित करने के लिए, समृद्ध पोषक तत्वों, कम रेडॉक्स क्षमता और विशेष विकास कारकों के साथ एक विशेष माध्यम तैयार करना आवश्यक है।


एनारोबिक कल्चर माध्यम आमतौर पर हृदय, मस्तिष्क या अन्य अंगों के अर्क से तैयार किया जाता है, और अक्सर सोडियम थायोग्लाइकोलेट, सिस्टीन, मांस अवशेष, कम लोहा, सक्रिय कार्बन और अन्य कम करने वाले एजेंटों या डीऑक्सीडाइजिंग सामग्री को जोड़ना आवश्यक होता है। संस्कृति माध्यम की ऑक्सीजन सामग्री का निरीक्षण करने के लिए, एज़ूरोल या मेथिलीन ब्लू को रेडॉक्स संकेतक के रूप में तरल संस्कृति माध्यम में भी जोड़ा जा सकता है। हृदय, मस्तिष्क का अर्क, यकृत द्रव्यमान और मांस के अवशेषों में असंतृप्त वसा अम्ल होते हैं, जो संस्कृति माध्यम में ऑक्सीजन को अवशोषित कर सकते हैं। सोडियम थियोग्लाइकोलेट और सिस्टीन मजबूत कम करने वाले एजेंट हैं, जो संस्कृति माध्यम में घुली ऑक्सीजन का उपभोग कर सकते हैं। शुष्क सक्रिय कार्बन और शोषक कपास भी संस्कृति माध्यम में ऑक्सीजन को अवशोषित कर सकते हैं। इसलिए, संवर्धन माध्यम में कम करने वाले एजेंट और अवशोषित सामग्री को जोड़ने का उद्देश्य संस्कृति माध्यम का एक एनोक्सिक वातावरण बनाना और कम रेडॉक्स क्षमता बनाए रखना है। इसके अलावा, संस्कृति माध्यम और वातावरण के बीच संपर्क को अलग करने के लिए संस्कृति माध्यम की सतह पर तरल पैराफिन की एक परत को जोड़ा जा सकता है।


7. लिक्विड ऑफ कल्चर सेल (एलसीएल) विभिन्न प्रयोजनों के लिए इन विट्रो में जीवित ऊतकों, अंगों और कोशिकाओं के संवर्धन, संरक्षण और परिवहन के लिए उपयोग किए जाने वाले तरल को संदर्भित करता है। संक्षेप में, यह एक पोषक वातावरण है जो कृत्रिम रूप से विवो में विकास का अनुकरण कर रहा है, ताकि कोशिकाएं इस वातावरण में विकसित और पुन: उत्पन्न हो सकें। चूंकि इसके घटकों की संख्या स्पष्ट है और यह एक निश्चित घटक को विनियमित करके अध्ययन की गई वस्तु के विभिन्न जैविक परिवर्तनों का निरीक्षण कर सकता है, इसका व्यापक रूप से कोशिका जीव विज्ञान के अनुसंधान में उपयोग किया जाता है। सेल कल्चर सॉल्यूशन के घटकों में मुख्य रूप से पानी, अमीनो एसिड, विटामिन, कार्बोहाइड्रेट, अकार्बनिक आयन, वृद्धि कारक आदि शामिल हैं। इन घटकों का उपयोग करने से पहले इनका कड़ाई से चयन और परीक्षण किया जाना चाहिए। उपयोग किए गए पानी को ग्रेड 2 टेस्ट वॉटर (सीबी / टी 6682-1992) की आवश्यकताओं को पूरा करना चाहिए।


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